CFTR and B-cell chronic lymphocytic leukemia: 伊布替尼药物作用依赖BIM表达,BIM低表达可诱导伊布替尼药物抗性:为阐明BIM在伊布替尼药物中的作用,我们首先检测伊布替尼敏感细胞株中细胞凋亡时BIM的变化情况。BIM同工型之一的BIM EL的表达最为丰富,因此我们通过检测BIM EL来反映BIM的表达变化。在伊布替尼敏感的MEC1细胞中,使用伊布替尼10 μmol/L、15 μmol/L分别作用24 h后发现BIM EL和PARP CF蛋白(PARP剪切产物,即Cleaved PARP)表达均增加且具有浓度依赖性(图2A)。进一步动态检测伊布替尼10 μmol/L作用不同时间的蛋白变化情况,结果显示细胞凋亡PARP CF蛋白表达随着BIM EL表达增加而增加,且具有时间依赖性(图2B)。相关性分析也显示,PARP CF的表达水平与BIM EL呈强相关性(R=0.98,P<0.005,图2C)。以上结果均证明,伊布替尼的促凋亡作用依赖BIM介导。为进一步明确BIM低表达对CLL细胞生物学功能的影响,我们设计3条针对BIM的shRNA序列(shBIM#1、shBIM#2和shBIM#3)构建BIM敲低稳转细胞株(图2D、E)。