检测MRD至少需要获取2×105个细胞,使得方法学敏感性达10−4。对于追求疾病缓解最大化的临床试验、CAR-T细胞治疗、造血干细胞移植等治疗手段,选择10−5~10−6作为阈值更具临床价值,可采用二代FCM,即当获取细胞数大于2×106时,敏感性能达到10−5以下。值得注意的是,CD20等单克隆抗体在治疗中的应用会给MRD检测技术带来假阴性结果,数据分析时应紧密结合免疫治疗史。而CAR-T细胞治疗后会导致靶点抗原的丢失和减弱,MRD检测时需要增加替代设门抗体,如CD19 CAR-T细胞治疗后,CLL可采用ROR1联合CD24作为替代设门标记,其他B-NHL可选择CD22、cCD79a、CD24+/CD66b-作为设门标记[26]–[29]。. The gene discussed is CD19; the disease is B-cell chronic lymphocytic leukemia.