CD5 and B-cell chronic lymphocytic leukemia: FCM检测:每管分别加入混匀的100 μl抗凝外周血,加入单克隆抗体CD5PC7、CD19APC、CD49d-PE、CD45KO各5 μl。混匀,室温避光孵育15 min。加入500 μl红细胞裂解液,10 min后加入等量磷酸盐缓冲液(PBS)混匀静置5 min。1 500 r/min(离心半径10 cm)离心3 min,去上清后加入1 000 μl PBS 洗涤,最后加入500 μl PBS悬浮细胞,上机。每管至少获取500 000个细胞。先以SSC和CD45设门找出淋巴细胞,再以CD5+CD19+确定CLL肿瘤细胞,进一步分析CD49d的表达模式。以CD5+设门找出T淋巴细胞,以确定阴、阳性门位置。