NUDT15 and acute lymphoblastic leukemia: 基因型检测:所有ALL患者初诊时留取骨髓标本,分离单个核细胞,利用QIAamp DNA 试剂盒(德国Qiagen 公司产品)提取基因组DNA。DNA样本均保存于−20 °C。我们选择了涉及6-MP代谢的4个SNP位点(TPMT*2 rs1800462、TPMT*3B rs1800460、TPMT*3C rs1142345、NUDT15 rs116855232),并应用TaqMan SNP基因分型试验来检测患者的基因分型。所有SNP位点的Taqman探针和TaqPathTM ProAmpTM Master Mixes均购自美国赛默飞科技公司。在QuantStudioTM 5 Real-Time PCR 仪上进行上述实验,反应体系如下:每孔10 μl,包含5 μl TaqPathTM ProAmpTM Master Mix (1×)、0.5 μl TaqMan 探针(20×)、2 μl DNA(10~20 ng/μl)、2.5 μl ddH2O;反应条件:60 °C 30 s,95 °C 5 min;95 °C 15 s,60 °C 60 s 或 90 s 45个循环,60 °C 30 s。使用QuantStudioTM设计和分析软件v1.4.1进行等位基因分析。