KRT19 and non-small cell lung carcinoma: 制备NSCLC细胞系A549细胞、HCC827细胞、NCI-H1650细胞株、NCI-H3122细胞株的单细胞悬液, 经计数后分别以50、100、200、500、1, 000共5个细胞数量梯度加入7.5 mL正常人全血中, 模拟CTC, 检测制备的磁球捕获CTC的能力。将待测模型的各分组细胞样品进行1, 000 rpm/min离心10 min; 小心取中上层液置于EP管中, 加入与其等量的PBS充分混匀。随后加入EGFR和Vimentin及FA纳米脂质磁球20 μL, 室温下孵育15 min, 每5 min混匀1次; 将离心管插入磁分离架吸附10 min, 吸弃上清液后加入10 μL 4%的多聚甲醛固定细胞10 min; 使用PBS溶液对固定处理的捕获CTC进行磁分离洗涤2次; 加入10 μL FITC标记的CK19单克隆抗体(CK19-FITC)、20 μL DAPI染色液、10 μL PE标记的CD45抗体(CD45-PE), 混匀后避光染色15 min; 染色结束后, 磁分离5 min, 用去离子水洗涤两次, 充分洗掉未结合的抗体和DAPI; 最后向离心管中加入15 μL去离子水重选CTC, 混匀后的液体均匀涂于多聚赖氨酸处理的防脱载玻片, 待液滴干于荧光显微镜下观察计数。