为提高IHC用于诊断ALK阳性NSCLC的特异性,2013年罗氏/Ventana公司在BenchMark平台上进一步优化了D5F3抗体检测试剂盒及其检测流程。其优势在于一抗孵育后的充分水洗过程,最大程度的解决了特异性的问题。与此同时,该试剂盒加入两级放大的Optiview系统,使得原本表达非常弱的ALK融合蛋白得以呈现较为明显的染色效果,并以NSCLC细胞株来源的二合一质控片作为内部对照,最大程度地保证了结果的可靠性。该方法阳性结果判读标准为肿瘤细胞胞浆中出现簇状综黄色强染色颗粒,胞膜着色视为阴性结果。大部分阳性肿瘤显示均匀强表达如图 2(图 2A、图 2B),个别阳性病例则由于肿瘤异质性表现为表达强度的不均一性,如图 2(图 2C、图 2D)(图片来自罗氏公司提供的结果判读说明)。多项Ventana IHC与FISH检测结果对照研究表明二者的一致率为94%-100%,如表 2所示。基于此数据,欧盟以及中国已经批准Ventana IHC用于检测ALK重排,并可指导克唑替尼治疗。. This evidence concerns the gene ALK and non-small cell lung carcinoma.