TP53 and non-small cell lung carcinoma: 目前检测基因突变的方法有很多,最常用的有直接测序法、荧光探针法、单链构象多态(single-strand conformation polymorphism, SSCP)法、变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)等,各种方法均有不同的优缺点。直接测序法由于能直接鉴别出具体突变的碱基,所以一直都被作为检测突变的金标准。但这种方法步骤繁琐,耗时长,费用高,敏感性相对低,难以达到临床上的需要。本研究使用的HRM法是近几年来在国内外兴起的最新的单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphism, SNP)及突变研究的工具。它是通过熔解温度(Tm)的迁移而产生不同形状的熔解曲线来区分不同的基因型。这种方法不受突变碱基位点与类型的局限,无需根据不同的序列设计特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨率熔解,就可完成对样品基因型的分析。HRM法所使用的PCR扩增酶必须是热启动酶,减少非特异性扩增,使用的染料必须是饱和染料,才能根据熔解曲线的不同来区分不同的基因型。应用HRM法筛选NSCLC肿瘤标本的p53基因突变样品,具有操作简便、快速、敏感、单管避免污染等优点,完全符合临床个体化治疗的要求,值得推广。