HDGF and non-small cell lung carcinoma: 采用SP法检测HDGF蛋白在手术切除NSCLC组织标本中的表达情况。步骤如下:组织蜡块切片厚度为3 μm,常规脱蜡脱苯,梯度酒精水化,内源性过氧化物酶阻断12 min,高压抗原修复,HDGF抗体稀释比例为1:10, 000孵育过夜(4 °C过夜),二抗体室温下孵育15 min,链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶溶液室温下孵育15 min,DAB溶液显色1 min-3 min,苏木素复染10 min,1%盐酸酒精分化10 s,自来水浸泡20 min,返蓝,脱水,透明,封片,显微镜观察。所应用抗体的敏感性及特异性已由我们及合作者前期研究所证明[6, 7, 15, 16]。以PBS代替一抗作为阴性对照,每批染色切片均用同一病例已知阳性切片作阳性和阴性对照。